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淮安市保障性住房建設有限公司

RNAPEI轉染試劑使用注意事項

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線(xiàn)性PEI轉染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細胞。線(xiàn)性PEI轉染試劑廣適用于常見(jiàn)細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線(xiàn)性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線(xiàn)性PEI轉染試劑均經(jīng)過(guò)轉染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉染16h后,超過(guò)95%的細胞表達eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉染試劑?RNAPEI轉染試劑使用注意事項

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對大多數細胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線(xiàn)性PEIMAX轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠(chǎng)前都經(jīng)過(guò)嚴格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩定且品質(zhì)高,但由于作為轉染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱(chēng)量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),細胞品系…)造成溶解出現問(wèn)題或者轉染效率出現差異,所以廠(chǎng)家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對極個(gè)別客戶(hù)溶解問(wèn)題和轉染效率問(wèn)題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!浙江高性?xún)r(jià)比PEI轉染試劑哪里有賣(mài)GMP等級的PEI轉染試劑?

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瞬時(shí)轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí),去除生長(cháng)培養基,替換成無(wú)血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定適合檢測時(shí)間。

線(xiàn)性PEI轉染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細胞。線(xiàn)性PEI轉染試劑廣適用于常見(jiàn)細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線(xiàn)性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線(xiàn)性PEI轉染試劑均經(jīng)過(guò)轉染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉染16h后,超過(guò)95%的細胞表達eGFP。更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!用PEI轉染試劑時(shí)出現沉淀是什么原因?

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注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉染級無(wú)內質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養基沒(méi)有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。PEI轉染試劑對復合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產(chǎn)PEI轉染試劑好用么

如何辨別假的PEI轉染試劑?RNAPEI轉染試劑使用注意事項

穩定轉染方法:

1.接種細胞:轉染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。

2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會(huì )稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉染細胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí),去除生長(cháng)培養基,替換成無(wú)血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。

4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。

歡迎咨詢(xún)PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉染試劑使用注意事項

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色母粒生產(chǎn)的工藝流程如下:1、捏合法,是將顏料和油性載體摻混后,利用顏料親油這一特點(diǎn),通過(guò)捏合使顏料從水相沖洗進(jìn)入油相。同時(shí)又由油性載體將顏料表面包覆,使顏料分散穩定,防止顏料凝聚。2、金屬皂法,是顏 。

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激光隱形切割是一種全新的激光切割工藝,具有切割速度快、切割不產(chǎn)生粉塵、無(wú)切割基材耗損、所需切割道小、完全干制程等諸多優(yōu)勢。激光隱形切割**早起源于激光內雕,其原理是將短脈沖激光光束透過(guò)材料表面聚焦在材 。

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