常用培養基的制備及注意事項一、實(shí)驗目的了解培養基的配制原理；掌握配制培養基的一般方法和步驟；了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗原理培養基是人工按一定比例配制的供微生物生長(cháng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養物質(zhì)的混合物。培養基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機鹽、生長(cháng)因素和水。根據微生物的種類(lèi)和實(shí)驗目的不同，培養基也有不同的種類(lèi)和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養基是一種應用較普遍和較普通的細菌基礎培養基，有時(shí)又稱(chēng)為普通培養基。由于這種培養基中含有一般細胞生長(cháng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養物質(zhì)，所以可供微生物生長(cháng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達到殺死微生物的效果。培養基制備器每稱(chēng)完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊，置于左側。海南培養基制備器價(jià)格

制備培養基的操作要點(diǎn)：用過(guò)的玻璃器皿：凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時(shí)沖洗，吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經(jīng)過(guò)適當消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿，可用洗液浸泡適當時(shí)間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸，其作用是將有機物氧化成可溶性物質(zhì)，以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用，使用時(shí)應特別小心，避免濺到衣服、身體和其他物品上。吉林自動(dòng)攪拌培養基制備器制備培養基的操作要點(diǎn)：半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中，就制成了半固體培養基。

培養基的購置：從培養基自身的質(zhì)量來(lái)看，不同生產(chǎn)廠(chǎng)家的產(chǎn)品，甚至同一廠(chǎng)家不同批號的產(chǎn)品都會(huì )存在差異。依據ISO/IEC17025《檢測和校準實(shí)驗室能力的通用要求》，對培養基的供應企業(yè)進(jìn)行評價(jià)后選擇合格的供應商，這是培養基購買(mǎi)過(guò)程中重要的步驟。應選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)；企業(yè)是否通過(guò)了質(zhì)量管理體系的認證是較為客觀(guān)的評價(jià)指標。要求生產(chǎn)企業(yè)提供：培養基成分名稱(chēng)及產(chǎn)品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價(jià)和所用測試菌株、技術(shù)數據清單、質(zhì)控證書(shū)以及必要的安全/危害數據等材料。

制備培養基的操作要點(diǎn)：a.液體培養基所配制的培養基是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水，沒(méi)有明顯的固形物，液體培養基營(yíng)養成分分布均勻，易于控制微生物的生長(cháng)代謝狀態(tài)。b.固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等，以瓊脂為常用。固體培養基在實(shí)際中用得十分普遍。在實(shí)驗室中，它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。c.半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中，就制成了半固體培養基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時(shí)可用來(lái)觀(guān)察微生物的動(dòng)力，有時(shí)用來(lái)保藏菌種。培養基制備器一般液體培養基可用濾紙過(guò)濾法，濾紙應拆疊成折扇成漏斗形。

培養平板培養基是被用于獲得微生物純培養的很常用的固體培養基形式，它是冷卻凝固后的固體培養基在無(wú)菌培養皿中形成的培養基固體平面，常被簡(jiǎn)稱(chēng)為培養平板。也叫平面培養基、平皿培養基。平板培養基常用于單孢分離，測定菌絲生長(cháng)速度，觀(guān)察菌落的形態(tài)，拮抗實(shí)驗，測定接種空間雜菌數。平板培養基制作方法如下：將培養皿洗凈、干燥，使各培養皿蓋方向一致，用牛皮紙包好，或放入特制鐵罐內，注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養基置于無(wú)菌箱或超凈工作臺內，先左手持三角瓶,右手反轉手掌用中指和無(wú)名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時(shí)將三角瓶轉換至右手，而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開(kāi)一縫，至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后，傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上，以免沾染皿壁)，迅速蓋好皿蓋，置于桌上輕輕旋轉平皿,使培養基均勻分布于整個(gè)平皿底部,冷凝后即為平板培養基。有時(shí)凝固后的培養基表面有冷凝水，可將平皿蓋打開(kāi)倒置于37℃溫箱，除去冷凝水，否則將影響平板分離培養效果。為防止冷凝水過(guò)多，也可將培養基冷卻至45~50°C再倒平板。全自動(dòng)培養基制備分裝系統：一體化控制;主機和選配件（附加劑泵）可通過(guò)Mediafill觸摸屏一起控制。湖南瓊脂培養基制備器

培養基制備器殺菌劑可從此口加入，也可用注射器從硅酮膜注入。海南培養基制備器價(jià)格

對LST（月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯）培養基進(jìn)行滅菌時(shí)，有時(shí)發(fā)酵管內會(huì )有氣泡。為防止發(fā)酵管內產(chǎn)生氣泡，可以采取以下幾項措施：（1）小倒管浸滿(mǎn)培養基（不留氣泡）后再加入到盛LST的試管中。（2）滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前，將鍋內氣體排干凈。（3）試管塞不要塞得太緊（使用硅膠塞的時(shí)候），勿使用橡皮塞。（4）不要過(guò)早打開(kāi)滅菌鍋，要等滅菌鍋內氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開(kāi)滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡，可用水做培養基組的對照試驗，若培養基組有氣泡，而對照組沒(méi)有氣泡，可確定是培養基自身的原因。海南培養基制備器價(jià)格

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